Sublytic C5b？9刺激上调KLF4促进肾小球系膜细胞生成IL？23的作用

目的：研究转录因子KLF4调控sublytic C5b?9刺激肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cell，GMC）诱导促炎因子白介素?23（IL?23）生成的作用。方法：构建KLF4的短发夹状小干扰RNA（shKLF4）及过表达质粒（pIRES2?KLF4）。将pIRES2?KLF4或shKLF4 转染GMC后再行sublytic C5b?9刺激，用qPCR、Western blot和ELISA法检查沉默或过表达KLF4基因后对GMC产生IL?23的影响。此外，构建IL?23基因近端启动子全长质粒，行荧光素酶报告基因实验测定沉默或过表达KLF4基因后对IL?23启动子活性的影响。结果：①Sublytic C5b?9刺激GMC后能明显促进IL?23的生成，而沉默KLF4基因后，由sublytic C5b?9诱导GMC产生的IL?23明显减少，但过表达KLF4后IL?23的水平则显著增加。②Sublytic C5b?9刺激GMC能显著上调IL?23的启动子活性，而沉默KLF4基因后由sublytic C5b?9诱导的IL?23启动子活性明显降低，但过表达KLF4后又能显著升高IL?23的启动子活性。结论：Sublytic C5b?9刺激诱导IL?23的生成可通过其刺激上调转录因子KLF4的表达而实现。