基于易错PCR技术定向进化枯草芽孢杆菌β-葡聚糖酶

摘要 利用易错PCR技术对来自枯草芽孢杆菌的β-葡聚糖酶基因（bgls）进行改造，并对野生酶和突变酶的酶学性质进行研究。以枯草芽孢杆菌基因组DNA为模板，通过易错PCR技术得到突变基因产物，将其重组于表达载体pET32a（+），构建β-葡聚糖酶基因的突变体文库，通过刚果红平板染色法进行高通量筛选，最终获得两株突变酶，其最适作用温度比野生酶都提高了15℃，最适pH与野生酶基本相同，野生酶酶活力为84.2 U/mL，突变酶酶活力分别为247.3 U/mL和125.1 U/mL，是野生酶酶活的2.9倍和1.5倍。试验获得了具有耐高温高酶活的β-葡聚糖酶，为β-葡 聚糖酶的工业化应用奠定基础