红树林微生物DH-2胞外蛋白酶的性质及产酶条件优化

摘要 从大亚湾红树林土壤样品中分离得到产蛋白酶菌株，鉴定所产胞外蛋白酶的酶学性质以及菌株的最佳发酵培养条件。采用平板透明圈法筛选菌株，福林酚显色法测定蛋白酶的酶活，通过单因素和正交试验确定其最佳发酵培养基以及发酵条件。从壤样品中分离得到一株产蛋白酶的枯草芽孢杆菌DH-2，该菌株分泌的蛋白酶最适反应pH和温度分别为8.0和65℃，50℃保温处理60 min后，剩余酶活仍保留80%以上。该蛋白酶对多种金属离子、有机溶剂及表面活性剂均有较好的耐受性。确定该菌株产蛋白酶的最适条件：1%（m/V，下同）可溶性淀粉，1%胰蛋白胨、1% NaCl，初始pH 5.5及7%的接种量，40℃培养36 h。在最适条件下测得其发酵液的酶活为236.30 U/mL，约为初筛时的酶活的8倍。该蛋白酶具有较为广阔的作用温度和pH范围，金属离子、有机溶剂及表面活性剂耐受性好，酶的性质比较稳定