人C反应蛋白在不同原核表达载体及菌株中的表达及免疫反应性分析

摘要 构建人C反应蛋白(CRP)原核表达载体, 并分别将其转化进入E.coli BL21(DE3)和Rosetta gami 2(DE3)pLysS中, 诱导CRP重组蛋白的表达；主要运用了基因工程, 亲和层析及透析复性等方法。成功构建了CRP原核表达载体及菌株。经IPTG诱导后, 得到了不同的重组CRP蛋白。结果表明, 相同表达载体在不同的表达菌株中的表达情况有一定差别, 分别在大肠杆菌及Rosetta gami2(DE3)pLysS中表达并得到了重组CRP的包涵体, 对复性后的CRP重组蛋白进行Westen blotting及ELISA检测, 结果表明原核表达的重组CRP蛋白的免疫反应性很低, CRP蛋白发挥免疫活性需要以五聚体形式存在