乙肝病毒X 基因可调控表达细胞模型的构建

摘要 利用四环素诱导型慢病毒系统（Lentil-XTM Tet-On Advanced Inducible Expression System）构建了含有乙肝病毒X 基因（HBx）的可诱导表达载体质粒，利用慢病毒包装细胞系HEK293T 细胞分别获得含有调控元件rt-TA 和HBx 基因的病毒颗粒，滴度达到108 LPs/mL。将两种病毒先后感染HepG2 肝癌细胞系，分别利用G418 和Puromycin 抗生素筛选获得整合有HBx 基因的稳定细胞株。在体系中加入Dox 时，应用RT-PCR 和Western blot 方法验证了HBx 基因的可诱导表达。可诱导表达细胞模型构建成功，为进一步研究HBx 基因在对宿主感染致病和免疫耐受中的作用提供了一种较理想的试验模型