马尾松毛虫质型多角体病毒NSP1蛋白在昆虫细胞表达及定位

摘要 马尾松毛虫质型多角体病毒（Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus,DpCPV）基因组S5片段编码一个由881个氨基酸组成、分子量为101 kD的非结构蛋白（NSP1）。为探寻DpCPV NSP1蛋白的功能,将DpCPV 1基因组S5-1片段的抗原区（1-600 bp）进行了原核表达,并将纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。将稀释后的病毒液感染甜菜夜蛾幼虫,感染后每天解剖甜菜夜蛾并取中肠样品,通过Western blot检测NSP1蛋白的合成时间曲线。Western blot检测结果显示,S5片段表达的蛋白在病毒感染第1天就有合成,并且除了检测到全长的蛋白（101 kD）外,也检测到了80 kD和20 kD的蛋白条带,说明NSP1蛋白为早期表达蛋白,并且蛋白发生了切割。另外,首次对DpCPV 1 S5片段进行了在昆虫细胞中表达和昆虫亚细胞定位,结果显示,昆虫细胞定位于细胞的细胞质