草鱼(Ctenopharyngodon idellus)NCCRP-1基因的克隆和原核表达

摘要 应用RACE PCR克隆了草鱼NCCRP-1 基因。结果表明，NCCRP-1 cDNA全长900 bp，开放阅读框为714 bp，编码237个氨基酸残基，预测分子量为27.3 kD，理论等电点为5.63。草鱼 NCCRP-1具有NCCRP-1蛋白家族保守的功能区域，与鲤鱼该基因(Cyprinus carpio L.)的相似性为 88%。将此基因定向插入原核表达载体pET-32a，构建重组质粒pET-NCCRP后转化BL21(DE3)进行诱导表达。SDS-PAGE分析显示在47.8 kD处出现特异性蛋白条带，Western blot检测表明草鱼NCCRP-1融合蛋白成功表达