P2X7受体短肽单克隆抗体的制备及鉴定

摘要 旨在制备与鉴定鼠抗P2X7 受体的蛋白单克隆抗体。以人P2X7 受体的胞外段制备短肽作为抗原，皮下注射免疫Balb/c 小鼠。分离小鼠脾脏B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合并培养，挑选阳性杂交瘤细胞，扩大培养，制备和鉴定P2X7 其生物学效应。结果显示，获得1 株稳定分泌抗人P2X7 受体的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所分泌的单抗类型重链为IgG1，轻链为κ ；该株杂交瘤细胞腹水效价为1∶6.4×104；传30 代及液氮中保存6 个月，抗体效价稳定；Western blotting 检测证明该单抗与人细胞表面的P2X7 受体蛋白特异地结合。所制备的抗人P2X7 受体的单克隆抗体具有高度的特异性及稳定性，为针对P2X7 受体为靶点的抗体药物的开发应用、疾病的辅助诊断奠定了基础