柞蚕核型多角体病毒对柞蚕蛹卵巢细胞感染性研究

摘要 研究柞蚕核型多角体病毒(ApNPV) 与宿主细胞相互作用及形态发生机制, 以便更好地开发利用杆状病毒表达系统。体外培养柞蚕蛹卵巢原代细胞, ApNPV病毒悬液感染细胞, 测定细胞感染率及半数组织培养感染剂量, 应用倒置相差显微镜和电子显微镜观察ApNPV感染后细胞的形态学变化。结果显示, ApNPV感染柞蚕蛹卵巢细胞5 d, 倒置相差显微镜下观察即可发现细胞胀大, 细胞内有多角体病毒出现;感染7 d, 细胞内多角体病毒数量增多, 细胞感染率为40.2%, 细胞上清液中无包涵体病毒(NOV) 效价滴度为6.95×105 TCID50/mL。电子显微镜下观察到受病毒感染的细胞早期表现为细胞核膨大, 而后核内出现病毒发生基质和核衣壳, 核衣壳获得套膜形成病毒束, 发育为成熟的病毒粒子, 众多病毒粒子同时封存在一个折光性强, 具有蛋白质性质、直径在0.7-10 μm的多角体中。得出结论, ApNPV对柞蚕蛹卵巢细胞高度敏感, 其在柞蚕蛹卵巢细胞内复制为典型的杆状病毒非同步复制