磁珠富集法分离刀鲚微卫星标记

摘要 利用磁珠富集法分离微卫星序列，以开发长江刀鲚微卫星分子标记。将长江刀鲚基因组DNA经限制内切酶Mse I酶切，回收400-1 000 bp片段，安装接头，构建长江刀鲚全基因组PCR文库。用生物素标记的微卫星探针（CA）12与其杂交，磁珠富集含有微卫星序列的 DNA片段。将洗脱所得片段进行PCR扩增，然后进行克隆。经过菌落PCR检验后挑选出118个阳性克隆进行测序，其中97条含有微卫星序列。用设计合成59对微卫星引物对30尾养殖长江刀鲚进行引物的多态性筛选，得到9对多态性引物