聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质区带的快速负染技术

摘要 聚丙烯酰胺凝胶电泳中的快速负染为新近发展起来的方法,其原理为用还原型谷胱甘肽还原四唑鎓硝基蓝(nitroblue tetrazolium)使凝胶背景染色,而蛋白区带不被染色,成为白亮区带,故名为负染。此方法简单、经济,可在20分钟内完成,其灵敏度不亚于考马氏亮蓝染色。具体做法简介如下:凝胶电泳结束后,用无离子水洗涤凝胶板,将其置于含有8 mM 谷胱甘肽的1 M Tris-HCl,pH9.6溶液中作用15分钟,用无离子水洗涤胶板一次,而后再将胶置于含1 mM 四唑鎓硝基蓝的1 M Tris-HCl,pH9.6溶液中显色,约2分钟出现胶背景染色,而蛋白区带