VIGS 介导的番茄转录因子SlDREB2 基因的耐旱特征

摘要 SlDREB2 基因是利用rd29A 基因启动子的DRE 元件通过酵母单杂交技术从番茄幼苗（丽春）cDNA 文库中筛选得到的属于EREBP 家族的一个转录因子基因。利用构建病毒VIGS 载体，分别用含pBINTRB6、pTV00∷SlDREB2-1 和pTV00∷SlDREB2-2 重组载体的农杆菌GV3101 菌液灌根与叶片注射法侵染番茄植株，转化7 d 后进行病毒DNA 检测与验证。测定了干旱胁迫下侵染成功的番茄植株与野生型株系的生理指标，并通过Real-time qPCR 分析了VIGS 介导的SlDREB2 转录因子基因的表达特征。番茄植株干旱3 周胁迫处理后测定结果表明，野生番茄中脯氨酸和可溶性糖水平要高于被VIGS 病毒侵染的番茄植株，而丙二醛水平要低于被侵染植株，并且指标显示被pTV00∷SlDREB2-2 重组载体的农杆菌GV3101 菌液侵染的番茄植株抗旱性明显降低；复水1 周后，受VIGS 浸染株系丙二醛含量明显高于野生型，而可溶性糖与脯氨酸累积却低于野生型。Real-time qPCR 结果表明，经VIGS 病毒侵染过的番茄植株在胁迫处理时期SlDREB2 基因的相对表达量都明显低于野生型株系，表明番茄SlDREB2基因保守域末端459 bp 的特异片段具有较显著的沉默效果，说明VIGS 介导的SlDREB2 基因的表达受干旱诱导，该基因可以作为抗旱型作物品种改良的有价值基因