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- 2014
鸡胚胎干细胞多能性相关基因cNanog和cPouV干扰载体的构建及筛选Keywords: 鸡,胚胎干细胞,cNanog,cPouV,干扰载体 Abstract: 摘要 旨在构建靶向鸡胚胎干细胞多能性相关基因cNanog和cPouV的siRNA表达载体,并在体外检测其对cNanog和cPouV表达的抑制作用。分别选择cNanog和cPouV中3个区域合成寡聚核苷酸构建siRNA表达载体,同时构建cNanog和cPouV全基因表达载体来检测基因表达下调的效果。经Western blotting检测显示,所构建的siRNA表达载体可在293T细胞内表达siRNA或shRNA,诱发RNA干扰效应,从而抑制目的基因cNanog和cPouV的表达。不同位点的寡核苷酸序列抑制效率不同,其中pS3-cNanog和pS3-cPouV重组质粒的干扰效果和抑制效率最好。研究结果为后续得到稳定干扰cNanog 和cPouV基因的重组载体和进一步研究cNanog 和cPouV基因功能奠定了基础
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