产D-乳酸重组大肠杆菌ptsG基因的敲除及其混合糖同步发酵

摘要 为构建能够同时高效利用五碳糖和六碳糖发酵产D-乳酸的重组大肠杆菌工程菌，以能高效利用五碳糖发酵产D-乳酸的大肠杆菌工程菌E.coli JH13为出发菌株，通过Red同源重组技术敲除葡萄糖跨膜转运基因ptsG。实验结果表明，ptsG缺陷菌株E.coli JH15在10%混合糖(5%葡萄糖和5%木糖)培养基中发酵，可同时利用五碳糖和六碳糖以完成发酵；而对照菌葡萄糖消耗完才利用木糖，发酵结束还有 18 g/L木糖残留；JH15乳酸产量为83.04 g/L，相比于对照菌株提高了25.86%；在稻草秸秆水解液中发酵，JH15同时利用葡萄糖、木糖和L-阿拉伯糖，乳酸产量为25.15 g/L，转化率为86.42%。JH15 作为能利用混合糖同步发酵产D-乳酸的大肠杆菌工程菌，它的成功构建为利用廉价的木质纤维素水解物为原料发酵生产D-乳酸提供参考依据