红鳍东方鲀干扰素γ基因的原核表达

摘要 旨在探究一种简单高效的获取重组红鳍东方鲀IFNγ蛋白的方法。提取红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)肾脏组织的总RNA，并以其为模板进行RT-PCR扩增干扰素γ(IFNγ)基因序列。将IFNγ成熟肽序列与表达载体pET-32a(+)相连，成功构建了重组表达载体PET-32a-IFNγ。将其转化入E. coli BL21(DE3)感受态细胞后获得了重组表达IFNγ的基因工程菌。经IPTG诱导，pET-32a-IFNγ在BL21中得到了表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测，结果显示红鳍东方鲀IFNγ基因在大肠杆菌中的表达准确，且目的蛋白表达量较高