H1亚型猪流感病毒HA基因DNA疫苗的构建及其对Balb/c小鼠的免疫效果评价

以A/Swine/Guangdong/LM/2004(H1N1)猪流感病毒HA基因为模板，通过RT-PCR技术扩增出HA基因，并将其克隆到pCI-neo真核表达载体中，成功构建重组表达质粒pCI-HA，瞬时转染vero E6和293T细胞，通过免疫过氧化物酶单层细胞试验(Immunoperoxidase monolayer assay ，IPMA)、间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, iIFA)和蛋白免疫印迹（Western blot，WB）实验证明，HA基因能够在哺乳动物细胞中有效表达并具有良好的生物学活性。将重组质粒三次免疫8w雌性Balb/c小鼠后，ELISA试验和中和试验结果表明该重组质粒能够诱导小鼠产生较高的抗体滴度，并具有良好的中和活性。因此为H1亚型猪流感DNA疫苗的研究奠定了理论基础