原子力显微镜检测过表达α-突触核蛋白引起的线粒体结构变化

目的：利用原子力显微镜等方法，明确α-突触核蛋白（α-synuclein, α-syn）过表达对线粒体的影响。方法：将腺相关病毒（AAV）载体介导表达的α-syn (AAV /α-syn)病毒包装颗粒，给大鼠脑内黑质区定位注射，建立α-syn过表达的大鼠模型，并以AAV介导表达的报告基因LacZ (AAV/LacZ)为动物对照组。提取大鼠黑质脑组织的线粒体，并通过JC1染色检测线粒体膜电势（ΔΨ）变化和Western Blot检测线粒体中α-syn蛋白量的变化；采用原子力显微镜观测线粒体表面结构的变化。结果：实验组大鼠黑质脑组织过表达α-syn基因，第16周时，Western blot显示线粒体中α-syn蛋白量增加约2倍；JC1染色发现ΔΨ下降；原子力显微镜观测可见线粒体体积增大，线粒体膜表面出现较多孔道样改变。结论：大鼠黑质脑组织过表达α-syn基因，第16周时，可导致α-syn蛋白在线粒体积聚；并可引起线粒体增大、膜形成孔道样改变、ΔΨ下降