通过断裂内含肽介导的反式剪接合成大的蛋白
Keywords: 大的蛋白,毒性蛋白,膜蛋白,Npu DnaE内含肽,T7 RNA聚合酶
Abstract:
大肠杆菌难以表达大的蛋白，毒性蛋白以及膜蛋白，“Npu DnaE内含肽表达系统“使这些蛋白的表达成为可能。该系统的基本原理是：在特定位点处将目标基因（编码T7 RNA聚合酶的基因）断裂成两部分，然后分别与Npu DnaE内含肽的N端，C端片段融合，两种融合基因分别表达纯化，在体外将两种融合蛋白等摩尔比混合即可产生有功能的T7 RNA聚合酶。理论上，该体系也可用于合成其他大的蛋白，毒性蛋白或膜蛋白
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