两个不同启动子及其组合对碱性蛋白酶AprE异源表达的影响 *

背景 碱性蛋白酶(alkaline protease)是一种具有广泛用途的工业酶制剂,其发酵活力目前仍不能满足工业生产需要。目的 旨在通过优化启动子及其组合来提高Bacillus subtilis WB600 中碱性蛋白酶AprE的产量。方法 以Bacillus subtilis WB600 为出发菌株,成功构建了含有4种不同类型启动子(P1、P2、P-1-2、P-2-1)的碱性蛋白酶AprE表达菌株。结果 含不同启动子的4株重组菌均可成功表达碱性蛋白酶,发酵48h,含单一启动子P2的重组菌株表达碱性蛋白酶的活力为4 041U/ml,是P1的1.23倍。双启动子重组菌B.subtilis WB600/P-2-1-aprE表达的酶活性最高,是双启动子P-1-2的1.35倍,达到了6 125U/ml。结论 为工业化高产碱性蛋白酶提供了一种有效策略