Folpcs1基因对尖孢镰刀菌亚麻专化型的无性繁殖和营养生长的调控 *

背景 尖孢镰刀菌亚麻专化型[Fusarium oxysporum Schl.f.sp.Lini(Bolley) Snyder & Hansen]是一种引起亚麻枯萎病的土传真菌,对亚麻的产量及质量有严重的危害.研究表明,在小麦赤霉菌中C2H2型锌指转录因子Pcs1调控中间瓶梗(intercalary phialides)产生分生孢子.目的:鉴定pcs1同源基因Folpcs1在镰刀菌中的作用.方法: 对Folpcs1的基因组DNA及cDNA测序后,利用Split-Marker 基因敲除技术破坏该基因.构建含有潮霉素抗性基因(hph)的基因缺失盒.通过聚乙二醇(PEG)转化野生型原生质体法,获得了Folpcs1基因缺失突变株(ΔFolpcs1),并利用PCR法进行正负筛选.为了对缺失突变体互补,将pcs1及其上下游侧翼序列构建到pZWH1中后,回复到ΔFolpcs1中.结果: 测序结果表明,有一个654bp的内含子,cDNA序列长度为2 846bp.通过观察发现,敲除突变体的生长速率明显降低,培养基中几乎观察不到分生孢子.回复突变体回复了野生型菌株的生长速率及分生孢子产生过程.结论: 说明Folpcs1负责菌丝的营养生长和分生孢子的产生