新型神经保护肽[Gly14]-Humanin的表达，纯化和活性鉴定

Humanin（HN）是近年来在人体内发现的内源性多肽，能够保护神经细胞免于各种阿尔采默病病相关因素诱导的凋亡，HN肽链第14位氨基酸被Gly取代的突变体[Gly14]-Humanin（HNG），神经保护活性比HN高近1 000倍。但由于HNG天然获取的途径有限，限制了对其功能的进一步研究。本课题组构建了HNG的表达质粒pET32a/HNG，并将其转化大肠杆菌BL21 trxB (DE3)，诱导表达后HNG以可溶性融合蛋白的形式出现并用镍离子亲和层析纯化，纯化的融合蛋白用肠激酶切割后经反相层析得到纯化的HNG多肽（23 mg每1 L细菌培养液），重组HNG多肽的分子量经电喷雾电离质谱（ESI-MS）检测为2876.5道尔顿，其N末端8个氨基酸残基的序列经Edman降解法测定为A-M-M-A-P-R-G-F，均与理论值一致。神经细胞保护实验表明，重组HNG多肽的神经保护作用与天然的HNG相