嗜麦芽寡养单胞菌(DR-929)纤溶酶的发酵条件优化及其分离纯化

本试验研究了嗜麦芽寡养单胞菌（DR-929）纤溶酶的液体发酵条件及其分离纯化。最佳发酵条件为：可溶性淀粉2.0%，黄豆粉1.0%，酵母膏0.5%，NaCl 1.0%, CaCl2 0.02%，MgSO4 0.05%，种龄36h，发酵时间4d，初始pH 8.0或9.0，温度25℃，装样量30mL，接种量5%或6%。采用发酵液离心除菌，25%～70%饱和度的硫酸铵沉淀，Phenyl FF（high sub）疏水层析，Q-Sepharose FF离子交换层析，Superdex 75凝胶过滤层析对活性成分分离纯化。用SDS-PAGE电泳对纯化效果进行检验，结果表明在SDS-PAGE中得到单一条带，分子量28.3KD。最终纯化倍数和酶活回收率分别为271.5和24.5%