人肝再生增强因子在毕赤酵母中的表达、纯化和生物学活性的研究

肝再生增强因子（ALR）是一类胞源性肝细胞生长因子。为在毕赤酵母中分泌表达人肝再生增强因子（rhALR），以色谱法分离纯化后进行体外活性研究，构建表达载体pPICZαA- ALR，经电穿孔转入毕赤酵母中，用0.5％甲醇诱导表达；重组酵母培养上清经SDS-PAGE电泳和western blot鉴定后表明, rhALR以分子量为30kD的二聚体为主；定量分析结果表明，重组酵母培养上清中rhALR约占总蛋白的66％，表达量约为40mg/L；经DEAE柱和G75柱纯化后,获得的rhALR纯度大于95％，得率为52％；体外生物学活性实验表明，rhALR能明显促进HepG2、SMMC-7721和NIH-3T3细胞的增殖