香蕉束顶病毒DNA组分2、3的启动子区的组织特异性分析

香蕉束顶病毒（BBTV）基因组至少由6个大小约为1.0-1.1kb的单链环状DNA组分所组成，每一个DNA组分包含编码区与非编码区。本文在前人的研究基础上进一步了解BBTV DNA组分启动子的功能。首先根据BBTV 海南分离物的全序列，通过常规PCR扩增出长为540bp的 BBTV DNA3组分启动子序列BV3.1，同时通过重叠PCR扩增出646bp的DNA2与DNA3组分非编码区拼接的重组启动子序列BV23，分别替代pBI121 35S启动子序列与gus基因进行融合，构建植物表达载体pBIBV3.1、pBIBV23。农杆菌介导转化获得的pBIBV3.1转基因烟草经GUS化学组织染色后，在其叶片的叶脉处检测到微弱的GUS活性，证实了DNA3组分的韧皮部特异表达活性；而pBIBV23转基因烟草，其叶片经GUS组织化学染色后，在叶肉、叶缘及一些叶脉上检测到弱GUS活性,这表明由BV23驱动的gus基因在烟草中类似于组成型表达,则DNA2组分转录方式可能有异于DNA3组分