血清样本双向电泳操作条件的优化

为建立分辨率高、重复性好的血清样品双向电泳技术，本文从血清样品的水化、等电聚焦、胶条的平衡、胶条的染色等几个方面对双向电泳操作条件进行了分析。结果表明采用以下的操作过程可以获得分辨率高、重复性好的双向电泳结果：样品水化2小时（25℃)；胶条泡涨12-16小时(25℃)；17cm胶条的等点聚焦程序采用 250V线性1小时/1000V线性1小时/4000V线性2小时/8000V线性3小时/8000V线性10小时/500V快速0.5小时/，11cm的胶条的等点聚焦程序采用250V慢速4小时/1000V快速2小时/4000V快速1小时/8000V快速2.5小时/8000V快速7小时/500V快速30分钟；两次平衡各15-20分钟；银染条件为固定两小时或过夜，敏化50-60分钟,定影30-40分钟，显影10分钟左右,终止10分钟）。这一研究对利用双向电泳分析血清蛋白具有很好的参考价值