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ISSN: 2333-9721
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-  2008 

重组抗菌肽基因克隆及其在Pichia pastoris中的表达及鉴定

Keywords: antibacterial peptide,Pichia pastoris,expression

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摘要: 根据毕赤酵母对遗传密码的偏爱性,在不改动氨基酸序列的前提下,用化学法合成抗菌肽麻蝇素A的基因片段,合成片段拼接后,与α因子重组,重组基因再构建到表达载体pPIC9K上,得到受乙醇氧化酶l基因(AOX1)的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,经限制性酶切鉴定及核苷酸序列分析,阳性重组子转化 pastoris GS115宿主菌,经表型筛选,阳性克隆用甲醇诱导表达.表达产物经PAGE凝胶电泳分析、纯化及抗菌活性检测,结果表明,重组抗菌肽基因在酵母中获得高效表达,表达产物经α因子信号肽分泌到胞外,具有较强的抗菌活性

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