中枢神经系统感染性疾病病原体检测芯片的初步研究

目的：构建一种用于检测巨细胞病毒（CMV）、风疹病毒（RV）、单纯疱疹病毒I型（HSVI）、结核分枝杆菌（TB）、EB病毒（EBV）五种病原体的寡核苷酸芯片，用于中枢神经系统疾病的常见病原体的病因学诊断，为临床治疗提供依据。方法：首先根据病原体的特异性蛋白的相关序列设计70 mer寡核苷酸长探针，在优化探针的基础上，选择特异性好的探针构建不同种属多种病原体的寡核苷酸芯片，用随机引物方法对靶基因进行生物素直接标记，标记产物与芯片杂交后再与avidin-cy3反应，对杂交阵列洗涤后扫描。采用该寡核苷酸芯片对临床样本进行检测并与和PCR检测方法进行检测比较。结果：通过标准菌株检测证明该检测芯片具有很高的特异性。对临床标本的检测结果表明，我们研制的寡核苷酸芯片检测体系与PCR法的检测结果相比，两种检测方法没有显著性差异（ >0.05）,且一致性较好（Kappa值均大于0.75）,其特异度均在95%左右，敏感度均在83%以上。但是我们研制的寡核苷酸芯片只需要一次检测就可以完成对5种常见病原体的检测。结论：本实验构建的寡核苷酸芯片检测体系具有快速、方便、准确的特点，可以高通量的检测临床样本而无须进行细菌培养，为中枢神经系统重要病原体检测提供了一种有效工具