重组人促红细胞生成素中试纯化工艺研究

采用堆积床生物反应器，用无血清培养基培养分泌ｒｈＥＰＯ的工程细胞株ＸＰ９５０１。所收集的上清液，经过快速离子交换层析—反相—分子筛层析纯化后，所得ＥＰＯ纯度达９９％以上，比活性为１－５×１０５ＩＵ／ｍｇ。整个纯化全过程的ＥＰＯ体内活性回收率为４６％。所纯化的ＥＰＯ分子量为３６ｋｄ，等电点为３－５。免疫印迹证明其有天然ＥＰＯ的免疫原性，Ｎ端１５个氨基酸序列分析与文献报道一致。本纯化工艺路线简单，时程短，重复性好，适合于大规模生产重组人促红细胞生成素