PhoQ基因重组鼠伤寒沙门氏菌株的构建及毒力研究

应用PCR技术从鼠伤寒沙门氏菌基因组DNA中克隆phoQ基因片段，构建原核表达pUC18重组质粒，测定序列(GenBank登录号为DQ787014)，并转入鼠伤寒沙门氏菌，经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导，进行高效表达。对重组菌株、野生菌株进行毒力检测对比实验，通过口腔注入45日龄健康无菌KM小鼠，测定其半数致死量(LD50)。结果发现：重组菌株与野生菌株的毒力存在显著差异，其半致死量分别为3.981×107 cf u/ mL and 5.012×102 cf u/ mL，PhoQ基因重组菌株的毒力远远低于非重组菌株。说明phoQ基因是调节鼠伤寒沙门氏菌致病机制中一个重要的调节因子