乳糖诱导甜蛋白Monellin在大肠杆菌中的表达

根据已报道的单链Monellin甜蛋白的氨基酸序列，按大肠杆菌基因偏爱密码子，设计和人工合成了单链monellin基因。将单链monellin基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中，构建了重组表达载体pET28a-mon，转化大肠杆菌BL21(DE3)，得到表达Monellin的大肠杆菌工程菌株。借助SDS-PAGE分析方法，研究了乳糖代替IPTG诱导大肠杆菌表达甜蛋白Monellin。通过对乳糖作为诱导剂表达条件进行优化，Monellin的表达量可占细胞总蛋白的33.09%，与IPTG诱导表达量接近。本研究结果为乳糖作为诱导剂应用于重组大肠杆菌生产甜蛋白Monellin提供了参考依据