B3HM细胞免疫小鼠脾细胞scFv噬菌体展示文库的构建及表达

目的: 利用噬菌体展示技术构建B3HM细胞免疫小鼠的脾细胞表达scFv文库。方法: 用人骨髓细胞系B3HM细胞免疫小鼠，取其脾细胞采用RT-PCR方法扩增VH 和Vk基因并克隆入噬菌体展示表达载体，构建scFv文库，测定文库的库容量，BstNI酶切单克隆分析文库的多样性，对文库进行富集检测，鉴定单克隆噬菌体与B3HM细胞结合反应。结果:文库的库容为5×106cfu，单克隆的BstNI酶切图谱显示多样性，单克隆噬菌体抗体与B3HM细胞呈阳性反应。结论:噬菌体展示文库的成功构建为寻找新的致白血病相关基因，阐明白血病发病机理奠定了基础