溶胶凝胶法固定化黑曲霉脂肪酶的性质研究

近年来溶胶-凝胶法固定脂肪酶已成为研究热点。选用TMOS、MTMS、ETMS和PTMS 4种硅烷试剂对黑曲霉脂肪酶进行了固定化研究。固定化的最佳配方为ETMS/TMOS=5：1、水与硅烷试剂分子比为8；固定化脂肪酶的固定率为80.2%、相对活性为136.3%；以乳化橄榄油作为底物，在50℃和pH4.0的条件下，固定化脂肪酶与游离脂肪酶Km分别为1.899×10-4M和2.789×10-4M；最适反应pH均为pH4.0，固定化脂肪酶在pH4.0~pH5.5之间其活性能保持95%以上；固定化脂肪酶最适反应温度为60℃，较游离脂肪酶提高了10℃；固定化脂肪酶的酸碱稳定性和热稳定性较非固定化酶有显著的提高。固定化脂肪酶的使用寿命和保存稳定性良好，使用12次后仍能够保留71.7%活性，在室温避光条件下保存180天后仍可保留79.2%活性