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ISSN: 2333-9721
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-  2004 

白喉毒素DT386片段的表达纯化及细胞毒性研究

Keywords: 白喉毒素DT386片段,免疫毒素,原核表达与纯化,细胞毒性

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Abstract:

基于白喉毒素 (diphtheriatoxin ,DT)的免疫毒素在临床试验中普遍发现毒性反应 ,但机制尚不清楚。据推测 ,免疫毒素的细胞毒性源自DT的酶活性区和跨膜转运区 (N端 386~ 388个氨基酸 ,DT386)。为考察DT386毒素片段与毒性反应的关系 ,将DT386在E .coli中进行了表达、纯化 ,并初步观察了其细胞毒性。经Q SepharoseFF离子交换层析 ,获得纯度达 95 %的DT386蛋白。DT386杀伤HL60细胞的IC50 为 2× 1 0 -6mol L ,比免疫毒素的特异杀伤毒性低 1 0 0倍以上 ;但在高浓度下 ,DT386可非特异性杀伤多种细胞。小鼠体内实验初步结果表明 ,给药剂量高则体内毒性反应强烈。结果提示免疫毒素的剂量限制毒性与DT386的非特异细胞毒性有一定相关性 ,为进一步开展免疫毒素毒性相关研究提供了有益线索

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