谷氨酰t-RNA还原酶基因（hemA）的高效表达

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）中的hemA基因编码谷氨酰tRNA还原酶，该酶是B. subtilis代谢途径中由谷氨酸到5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）反应的限速酶。将B. subtilis的 hemA基因克隆到pET28a载体上，并在大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）中诱导表达，SDS-PAGE电泳分析，表达的目的蛋白占总蛋白的20%。通过分离纯化得到谷氨酰tRNA还原酶。重组菌发酵液上清中5-ALA含量达40.2 mg/L，菌液呈红色，过筛试验和紫外分光光度检测验证显色物质为卟啉类，实验表明，表达的重组蛋白促进了5-ALA的合成和代谢