固定化青霉素酰化酶在光-pH敏感可回用两水相中裂解青霉素G为6-APA

两水相体系在发展中存在的关键问题是相体系回收困难.由于生产成本及降低污染的原因, 用过的相体系需要回收和重复使用.用环境敏感型溶解可逆聚合物形成可回用两水相体系是当前是为可行的回收方法。本文在光敏感可回用高聚物PNBC与pH敏感型可回用高聚物PADB形成的两水相体系中进行固定化青霉素酰化酶的相转移催化青霉素G产生6-APA的反应。在这个两水相体系中，通过优化，在1% NaCl 存在下，６－ＡＰＡ的分配系数可达5.78。催化动力学显示，达平衡的时间近7h,反应最高得率约85.3%（pH 7.8, 20℃）。较相近条件下的单水相反应得率提高近20%。在反应过程中，通过底物及产物的分配系数检测，发现底物分配系数变化不大，而产物6-APA及苯乙酸的分配系数发生很大变化，从而引起产物的得率变化。在两水相中，底物及产物主要分配在上相，固定化酶分配在下相，底物青霉素G进入下相经酶催化产生的6-APA及苯乙酸又转入上相，从而解除了青霉素酰化酶催化反应的底物及产物抑制作用，达到提高产物得率的效果。此外，采用固定化酶较固定化细胞效率高，占用下相体积小，较游离酶稳定性高，且完全单侧分配在下相。因此，在两水相中进行固定化酶的催化反应具有明显的优越性。形成两水相的高聚物PNBC通过488 nm 的激光照射或经滤光的450nm 光源照射得到回收；pH敏感型成相聚合物PADB可通等电点 4.1沉淀可实现循环利用，高聚物的回收率在95%-98%之间，按此回收率计算，聚合物可使用60次以上