ZNF488基因对鼻咽癌细胞HONE1生物学行为的影响

摘 要：［目的］ 探讨ZNF488基因对鼻咽癌细胞HONE1生物学行为的影响。［方法］ 构建携带空载体、人ZNF488基因的逆转录病毒质粒pMSCV和pMSCV-ZNF488，以磷酸钙法转染293FT细胞并收集病毒液，感染鼻咽癌细胞株HONE1，经嘌呤霉素筛选及Western Blot鉴定，建立稳定表达ZNF488的HONE1-pMSCV-ZNF488和空载体HONE1-pMSCV的细胞株。应用噻唑盐（MTT）法、平板克隆形成实验检测ZNF488过表达对HONE1细胞生长增殖的影响，同时应用流式细胞术检测ZNF488对细胞周期增殖指数的影响。划痕实验及Transwell体外侵袭实验观察ZNF488对HONE1迁移侵袭能力的影响。Western Blot检测上皮—间质转化（EMT）相关蛋白及抑癌基因PTEN的表达情况。［结果］ 成功建立稳定表达ZNF488的HONE1-pMSCV-ZNF488细胞株，MTT 法及平板克隆形成实验结果显示，与空载体组HONE1-pMSCV细胞相比，HONE1-pMSCV-ZNF488细胞增殖及克隆形成能力均增强。流式细胞术显示过表达ZNF488细胞 S期百分比较空载体组高，增殖指数增加。划痕实验、Transwell 体外侵袭实验示ZNF488能够显著增加细胞的迁移、侵袭能力。Western Blot检测发现上皮标志E-Cadherin、α-Catenin表达降低，间质性标志Fibronectin、Vimentin表达升高，同时抑癌因子PTEN表达下降。［结论］ 过表达ZNF488可通过诱导鼻咽癌细胞HONE1发生上皮间质转变及下调抑癌基因PTEN，促进细胞的增殖及迁移侵袭能力