大口黑鲈溃疡综合征病毒MCP基因的原核表达及重组蛋白的免疫效果初步分析

摘要 为了预防近年来流行于广东省养殖大口黑鲈（Micropterus salmoides）中的病毒性溃疡综合征,以大口黑鲈溃疡综合征病毒（Largemouth bass ulcerative syndrome virus,以下简称 LBUSV）的主要衣壳蛋白（MCP）作为目标抗原蛋白,将MCP基因开放阅读框插入到pBV220载体中,转化大肠杆菌DH5α,构建重组表达MCP蛋白的工程菌。重组菌经过42℃温度诱导和SDS-PAGE电泳,检测到在分子量51 kD处有一条特异表达蛋白带,重组蛋白约占重组菌体总蛋白的30%。重组MCP蛋白经洗涤、纯化、溶解、复性和透析后纯度达90%以上。将纯化后的重组蛋白与不完全弗氏佐剂混合、乳化后,免疫大口黑鲈,然后进行感染实验,感染后20 d疫苗保护率最高达67.7%。结果表明,该病毒MCP蛋白具有一定的免疫原性,可以作为制作重组疫苗的候选蛋白