红鳍东方鲀（Takifugu rubripes）干扰素调节因子2基因的克隆及原核表达

摘要 干扰素调节因子（Interferon regulatory factor，IRF）是一种多功能的转录因子。采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆了红鳍东方鲀干扰素调节因子2（Interferon regulatory factor 2，IRF2）基因的全长cDNA。该基因全长为1 552 bp，其中5'非编码区（5'-UTR）187 bp，3'非编码区（3'-UTR）429 bp，编码区（CDS）为936 bp，共编码311个氨基酸。将IRF2的编码区序列连接到原核表达载体pET32a（+），成功构建了重组体pET32a（+）-IRF2。将重组体pET32a（+）-IRF2转入大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）中，获得了重组表达IRF2的基因工程菌。经IPTG诱导，pET32a（+）-IRF2在BL21中得到了融合表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测，结果显示红鳍东方鲀IRF2基因在大肠杆菌中的表达效果较高，目的蛋白准确