应用比色法检测枯草芽孢杆菌变异菌株中1-脱氧野尻霉素含量

摘要 为寻找测定枯草芽孢杆菌黑色变种突变株Bacillus subtilis var. niger-231(B-231)的发酵液中1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin，DNJ)的新方法并提高其产发酵液中DNJ的含量。在有铜离子的存在下，DNJ与二硫化碳反应，用有机溶剂对产物萃取后在440 nm进行光度测定，得到DNJ含量。再采用紫外诱变方法处理突变株B-231。绘制了检测DNJ标准品的标准曲线，对测定DNJ的新方法做了精密度、灵敏度、准确度以及产物的稳定性的探讨，设计正交试验优化了反应条件，并将此方法运用到细菌发酵液中DNJ含量的测定中，通过遗传诱变手段处理原始细菌B-231，最终筛选到一株高产DNJ的菌株，命名为B. subtilis var. niger- 431(B-431)，DNJ含量达87.3 mg/L，其产生DNJ的量较原始菌株原突变株提高了4.2倍。首次提出了一种快速测定细菌发酵液中的1-脱氧野尻霉素的新方法，紫外诱变手段使细菌产生DNJ的能力有较大提高