以STAT3为靶标的抗肿瘤药物高通量筛选模型的建立和应用

摘要 旨在建立稳定可靠的以转导与转录激活子(STAT3)为靶标的抗肿瘤高通量筛选模型，应用该模型筛选潜在的抗癌药物。利用基因重组、蛋白表达纯化技术，获得STAT3目的蛋白，使用酶联免疫吸附法(ELISA)进行高通量药物筛选，将筛选出的抑制剂在细胞水平上利用MTT比色法测定化合物对癌细胞增殖的影响。结果显示，成功构建表达载体pET-28a-STAT3；所建立的模型稳定可行，可用于以STAT3为靶标的抗肿瘤药物的高通量筛选；用该模型对8 248个样品进行筛选，在500 μmol/L药物浓度下，化合物MDC6抑制率为92%，另外，进行IC50值的测定时，分子水平上最低达到3.37 μmol/L，在细胞水平上可达到15.92 μmol/L。建立的高通量药物筛选模型，具有操作方便、成本低、结果稳定等特点，可用于STAT3抑制剂的大规模筛选