一种改良的热酚法高效快速提取酿酒酵母总RNA

摘要 以酿酒酵母单倍体CEN.PK1 与双倍体CEN.PK2 为研究对象，利用改良热酚法，快速高效地提取酿酒酵母总RNA。结果显示应用该方法提取的酿酒酵母CEN.PK1 和CEN.PK2 的总RNA 经分光光度计测定浓度为7.63 μg/μL 和3.77 μg/μL，OD260/280分别为2.10 和2.04，OD260/230 分别为2.32 和2.24，浓度与纯度均能达到后续分子生物学试验的要求。经PCR 与荧光定量PCR 检测，该方法提取的RNA 无DNA 污染，可作为PCR 反应的模板，与Trizol 方法提取RNA 相比，该方法不仅浓度高并且可将提取时间由常规的2.5 h 缩短为1.5 h，具有操作简单、 高质、高效等优点，经多次试验证明，此方法同样适用于酿酒酵母总RNA 的大量提取试验，有较高的实用价值