Us11的表达及其多克隆抗体的制备

摘要 已有研究发现单纯疱疹病毒1(HSV-1)感染后, 病毒的Us11 蛋白在拮抗宿主先天性免疫反应中发挥重要作用。通过合成HSV-1的Us11基因, 克隆表达制备针对Us11的多克隆抗体, 为研究Us11的功能以及与宿主蛋白的相互作用提供的实验基础。通过人工合成Us11基因并以其为模板扩增, 回收Us11基因片段, 克隆至原核和真核表达载体；诱导表达Us11蛋白并纯化, 制备Us11兔源多克隆抗体；转染质粒至293T细胞, 对细胞表达的蛋白进行间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(WB)检测。成功构建pCold-Us11和pFLAG-Us11质粒, 实现可溶性Us11蛋白表达, 纯化的Us11蛋白免疫动物获得针对Us11的多克隆抗体。IFA和Western blot结果显示, 制备的抗血清能特异性检测到pFLAG-Us11转染293T细胞表达的Us11蛋白