马铃薯块茎特异性启动子驱动的人白细胞介素-12的遗传转化研究

摘要 为获得高效表达人白细胞介素-12（hIL-12）蛋白的转基因马铃薯植株，利用根瘤农杆菌侵染法将前期构建的马铃薯块茎特异性启动子Ppatatin驱动的hIL-12植物表达载体导入马铃薯，通过共培养、筛选、分化等过程获得转基因植株，并结合PCR、RT-PCR、GUS染色及ELISA分析对转基因植株进行鉴定。结果显示，获得12个马铃薯转基因株系，PCR检测表明其中的10个株系目的基因已导入马铃薯基因组，转基因阳性率为83%；RT-PCR分析表明其中的7个株系外源基因在转录水平成功获得表达，ELISA分析表明其中的5个株系有明显的蛋白水平表达。对这7个株系后代的检测表明外源基因成功表达且具有良好的遗传稳定性