来源于假单孢菌206植酸酶基因的克隆、表达及酶学性质研究

摘要 从浙江嘉兴人工鱼塘底泥样品筛选到产植酸酶活性较高的假单孢菌(Pseudomonas fluorescens)206。通过简并PCR和TAIL-PCR技术从Pseudomonas fluorescens 206菌株基因组DNA中克隆得到一个新的编码组氨酸酸性植酸酶（HAP）的基因，命名为phyP。该基因ORF全长1 284 bp，编码了427个氨基酸和一个终止密码子，前24个氨基酸为信号肽。将phyP在大肠杆菌中表达，重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和阴离子交换柱纯化后达到电泳纯。对其酶学性质分析表明：重组植酸酶PhyP最适pH为5.5，在pH3.5-7.5的条件下具有较好的稳定性；重组植酸酶PhyP最适温度为45℃，在25℃时也具有较高的酶活性，因此植酸酶PhyP在饲料行业，尤其是水产行业具有潜在的应用前景