不同沉淀方法处理胶乳总RNA对基因扩增效率的影响

摘要 为探明沉淀方法对胶乳总RNA提取及PCR扩增效率的影响,并寻求较好的RNA沉淀方法,针对胶乳中蛋白、多糖、橡胶粒子含量高的特点,在本实验室改进的SDS法的基础上,分别用LiCl、NaCl+异丙醇、NaCl+NaAc+无水乙醇和NaAc+无水乙醇对橡胶树胶乳总RNA进行沉淀,并对所得RNA的完整性、纯度、含量和RT-PCR扩增效率进行比较。结果表明,4种方法均可获得完好的RNA,但其纯度、含量和PCR扩增效率随方法不同而有所差别,其中NaCl+NaAc+无水乙醇沉淀的橡胶树胶乳总RNA纯度、产率和18S、REF基因扩增效果均较高,故认为用NaCl+NaAc+无水乙醇沉淀胶乳总RNA是一种较为有效的方法