普通小麦幼苗叶肉细胞原生质体分离方法的优化

摘要 以7日龄小麦幼苗的叶肉细胞为材料，采用正交试验分析了纤维素酶浓度、离析酶浓度、酶解时间、甘露醇浓度对原生质体分离时的产量和活力的影响；采用瞬时表达技术通过PEG-Ca2+介导法转化小麦的原生质体，分析了PEG浓度对转化效率的影响。结果表明，小麦叶片原生质体分离的最佳条件为纤维素酶1.5%，离析酶 0.75%，甘露醇0.4 mol/L，酶解时间3 h，得到的原生质体的产量可达到7.2×106个/g·FW，活力超过95%；瞬时表达实验结果表明，在25% PEG浓度下，小麦原生质体的转化效率最高