诺卡氏菌酰胺酶在大肠杆菌中的重组表达及其在锦纶改性中的应用

摘要 将来源于诺卡氏菌(Nocardia farcinica) 的酰胺酶在E. coli中进行了重组表达。构建了重组表达质粒pET24a/AMID, 转入宿主菌E. coli Origami(DE3) 中, 0.4 mmol/L IPTG, 25℃诱导20 h后, 酶活为1.02 U/mL。在此基础上, 考察了重组酰胺酶在PA改性中的应用。通过优化温度、pH、处理时间和摇床转速等因素对酶处理的影响, 确定了酶处理的最优条件为: 40℃, pH7.5, 处理时间1 h, 摇床转速100 r/min, 在该处理条件下, 与磷酸缓冲液对比, PA吸水高度提高了8.7 cm, 上染率提高了23.1%, 基本能够达到碱处理的效果