溶藻弧菌中酯酶基因的克隆表达及其酶学性质研究

摘要 旨在克隆溶藻弧菌中的酯酶基因,并在大肠杆菌中异源表达,研究酯酶酶学性质。从溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）7S-1的基因组DNA中克隆得到酯酶基因estZ,将该基因连接入表达载体pET28a,并在Escherichia coli BL21（DE3）中表达,对纯化后的酯酶蛋白进行酶学性质分析。结果显示,表达菌株E. coli BL21-28a-estZ可高表达具有活性的酯酶,在18℃添加0.4 mmol/L IPTG的LB培养基中诱导22 h,酯酶的比酶活可达5.42 U/μg;重组表达的酯酶EstZ最适反应温度为25℃,最适pH为9.0。10 mmol/L Na+和Mg2+对其有较好的激活作用;Cu2+、Ni2+、Co2+对该酶活性有较大抑制。该酶对多种有机溶剂及表面活性剂具有一定的耐受性,同时具有较高的耐盐性。对溶藻弧菌中的酯酶进行研究为该菌更好的应用于生物脱墨技术奠定了理论基础