添加剂对大孔吸附树脂固定化脂肪酶的影响 *

利用大孔吸附树脂DA-201为载体对海洋脂肪酶固定化,并探寻添加剂对固定化过程的影响。分别以NH4Cl、甘露糖和甘氨酸为添加剂,采用单因素和正交实验相结合的方法优化条件。结果显示,以NH4Cl为添加剂的最优条件:柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液pH 6.0,固定化温度30℃,载体投放量0.5g,NH4Cl浓度25mmol/L,固定化时间3.0h,酶活力达到115.27U/g;比不含有添加剂的固定化酶固定化效率提高47.42%。以甘露糖为添加剂最优条件:磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液pH7.0,固定化温度35℃,载体投放量0.5g,甘露糖浓度10mmol/L,固定化时间4.5h;酶活力达到122.75U/g,比不含有添加剂的固定化酶固定化效率提高6.50%。以甘氨酸为添加剂的最优条件:磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液pH7.0,固定化温度20℃,载体投放量0.5g,甘氨酸浓度为25mmol/L,固定化时间7.5h;酶活力达到141.69U/g,比不含有添加剂的固定化酶固定化效率提高26.12%。采用不同添加剂对大孔吸附树脂DA-201的吸附固定化过程有较大影响,可以极大地提高吸附效率;同时发现缓冲液类型、pH、温度、添加剂浓度和固定化时间等对DA-201树脂吸附脂肪酶有很大影响,对后续吸附固定化工业酶研究有较好的参考价值