向日葵V-ATPase a3亚基基因的克隆及表达分析

采用RACE技术，从向日葵P50中克隆V-ATPase a3亚基基因cDNA全长，并进行生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR分析不同浓度、不同时间的NaCl、ABA和PEG模拟干旱胁迫条件下V-ATPase a3亚基基因的表达特征，以及相同胁迫条件下该基因在向日葵不同器官的表达特征。序列分析表明，该基因cDNA全长2 873bp，含5'-UTR 109bp、3'-UTR 295bp及编码区2 469bp，编码822个氨基酸，其编码蛋白质的理论分子质量为204.55kDa，等电点为6.29，GenBank登录号为KU315054。该基因编码的蛋白质为疏水性的跨膜蛋白，亚细胞定位预测其在质膜上。向日葵V-ATPase a3亚基与已报道的10种植物的V-ATPase a3亚基的同源蛋白有高度相似的保守区域，在进化上与朝鲜蓟的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明，向日葵受到NaCl、ABA和PEG模拟干旱三种非生物胁迫后，V-ATPase a3亚基基因均上调表达，但表达模式不同，不同器官存在特异性表达差异。研究认为，V-ATPase a3亚基基因响应了向日葵非生物胁迫的应答，为加强对V-ATPase基因的利用奠定基础